6. Übung Bioinformatik

6.1) Struktur-Vorhersage fuer Lectin, Cytostatin und Triose Phosphat IsomeraseTPI

Lectin:
SwissProt:http://www.expasy.ch/cgi-bin/get-sprot-entry?LEC_GALNI)
PDB:  http://www.rcsb.org/pdb/cgi/explore.cgi?pid=25401982251683&pdbId=1JPC
Cytostatin:
SwissProt:  http://www.expasy.ch/cgi-bin/get-sprot-entry?CYT_CHICK
PDB (1CEW):  http://www.rcsb.org/pdb/cgi/explore.cgi?pid=25401982251683&pdbId=1cew
Triose Phosphat Isomerase:
PDB: http://www.rcsb.org/pdb/cgi/explore.cgi?pid=25401982251683&pdbId=1btm
SwissProt: http://www.expasy.ch/cgi-bin/get-sprot-entry?TPIS_BACST.

6.1.a)Bestimmen Sie mögliche Targetting und Schnittstellen-Signale mit dem Signal-Predictor-Tool  vom  Center for Biological Sequence Analysis in Dänemark (http://www.cbs.dtu.dk/) und dem von Bernd Jagla entwickelten Schnittstellen-Identifikator (http://userpage.fu-berlin.de/~berndj/test.cgi).

6.1.b) Verwenden Sie fuer die Sekundärstrukturvorhersage die Tools GOR von Garnier und Robson:(http://molbiol.soton.ac.uk/compute/GOR.html) und den Centroid Secondary Structure Predictor  aus der Vorlesung. Vergleichen Sie die Sekundärstrukturvorhersage  jeweils mit der korrekten strukturbasierten Information.

6.1.c)Verwenden Sie das CATH-Tool, um die Strukturelle Einordnung des Proteins zu erfahren: welches sind die vier Hauptklassen (Class), in die die Proteine sich unterteilen lassen?
( http://www.biochem.ucl.ac.uk/bsm/cath/ http://www.biochem.ucl.ac.uk/cgi-bin/cath/CATHSrch.pl?query=1cew&type=PDB )

Anmerkung: Die Struktur und Sequenz-Datenbank Einträge sind oft nicht sehr konsistent, vor allem sind in der PDB oft Terminale Sequenzen abgeschnitten, um die Kristallisation zu ermöglichen.
MAGARGCVVL LAAALMLVGA VLGSEDRSRL LGAPVPVDEN DEGLQRALQF AMAEYNRASN
0000000000 0111010011 1110000000 0000000000 0000000000 0010000000
                        ^^Schnitt.^Hier faengt der PDB eintrag an!!
 

6.2) Vorhersage von Transmembran-Bereichen

Suchen Sie den Bacteriorhodopsin Precursor  von Halobacterium Halobium in der SwissProt Datenbank
BACR_HALHA ( http://www.expasy.ch/cgi-bin/sprot-search-de?bacr_halha )

6.2.a) Verwenden sie das ProtScale Tool mit der Hydrophobizitäts-Skala von Kyte und Doolittle, um eine Vorhersage der transmembranen Regionen zu machen. Legen sie bei der Klassifikation einen Schwellenwert von 1.0-1.5 zugrunde, variieren Sie die Grösse des gleitenden Fensters (sliding window, etwa 5,9,13). Vergleichen Sie mit den Röntgenstrukturdaten.

6.2.b) Wie gut funktionieren die Sekundärstruktur-Vorhersage Tools aus Aufgabe 1 bei diesem Protein?